Revisión sistemática de la exactitud diagnóstica de la gota gruesa en comparación con la reacción en cadena de la polimerasa para malaria asociada al embarazo, 2010-2022 / Systematic review of the diagnostic accuracy of thick smear compared to polymerase chain reaction for pregnancy-associated malaria, 2010-2022

RESUMEN Objetivos. Evaluar la exactitud de gota gruesa (GG) frente a la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) cuantitativa para la malaria asociada al embarazo (MAE). Materiales y métodos. Se realizó una revisión sistemática de pruebas diagnósticas en nueve bases de datos. Se evaluó la calidad metodológica con QUADAS. Se estimó sensibilidad, especificidad, cociente de probabilidad positivo (CPP) y negativo (CPN), razón de odds diagnóstica (ORD) y área bajo la curva ROC. Se determinó la heterogeneidad con el estadístico Q de Der Simonian-Laird y la incertidumbre con el porcentaje de peso de cada estudio sobre el resultado global. Resultados. Se incluyeron diez estudios con 5691 gestantes, 1415 placentas y 84 neonatos. En los estudios con nPCR (PCR anidada) y qPCR (PCR cuantitativa) como estándar, los resultados de exactitud diagnóstica fueron estadísticamente similares, con sensibilidad muy baja (50 y 54%, respectivamente), alta especificidad (99% en ambos casos), alto CPP y deficiente CPN. Usando nPCR la OR diagnóstica fue 162 (IC95%=66-401) y el área bajo la curva ROC fue 95%, mientras que con qPCR fueron 231 (IC95%=27-1951) y 78%, respectivamente. Conclusiones. Mediante un protocolo exhaustivo se demostró el bajo desarrollo de investigaciones sobre la exactitud diagnóstica de la GG en MAE. Se demostró que la microscopía tiene un desempeño deficiente para el diagnóstico de infecciones asintomáticas o de baja parasitemia, lo que afianza la importancia de implementar otro tipo de técnicas en el seguimiento y control de las infecciones por malaria en las gestantes, con el fin de lograr el control y posible eliminación de la MAE.

ABSTRACT Objective. To evaluate the accuracy of thick smear (TS) versus quantitative polymerase chain reaction (PCR) for pregnancy-associated malaria (PAM). Materials and methods. We carried out a systematic review of diagnostic tests in nine databases. Methodological quality was evaluated with QUADAS. Sensitivity, specificity, positive likelihood ratio (PLR), negative likelihood ratio (NLR), diagnostic odds ratio (DOR) and area under the ROC curve were estimated. Heterogeneity was determined with the Der Simonian-Laird Q method and uncertainty with the weighted percentage of each study on the overall result. Results. We included 10 studies with 5691 pregnant women, 1415 placentas and 84 neonates. In the studies with nested PCR (nPCR) and quantitative PCR (qPCR) as the standard, the diagnostic accuracy results were statistically similar, with very low sensitivity (50 and 54%, respectively), high specificity (99% in both cases), high PLR and poor NLR. When nPCR was used, the DOR was 162 (95%CI=66-401) and the area under the ROC curve was 95%, while with qPCR it was 231 (95%CI=27-1951) and 78%, respectively. Conclusions. We demonstrated that research on the diagnostic accuracy of TS in PAM is limited. Microscopy showed poor performance in the diagnosis of asymptomatic or low parasitemia infections, which reinforces the importance of implementing other types of techniques for the follow-up and control of malaria infections in pregnant women, in order to achieve the control and possible elimination of PAM.

Enfermedad de chagas congénito: presentación de caso clínico / Congenital chagas disease: case report

El agente etiológico de la enfermedad de Chagas es un protozoario parásito (Tripano-soma Cruzi) que causa una infección aguda y crónica, en humanos. La extensión del daño varía de acuerdo a las cepas parasita-rias y características individuales del hués-ped; puede causar incapacidad y muerte. Han sido descritas diferentes vías de infec-ción: vectorial, transfusional, accidental, digestiva y congénita. Esta última vía de la infección depende de dos indicadores bási-cos, la prevalencia de gestantes chagásicas e incidencia de la transmisión vertical. El diagnóstico presenta un desafío en aquellos lugares del país en donde, si bien la enfer-medad es considerada endémica, no se realiza actualmente el screening obligatorio en la embarazada. Es importante saber que el tratamiento antes del primer año de vida tiene una excelente respuesta y evita secue-las crónicas que pueden ser invalidantes en etapa adulta...(AU)

Prevalence of asymptomatic Plasmodium vivax infections in the north-eastern focus of malaria of Venezuela / Prevalencia de infecciones asintomáticas por Plasmodium vivax en el foco malárico oriental de Venezuela

Malaria remains as a public health problem in Venezuela. In 2015 there were 136,402 cases reported by the Ministry of Popular Power for Health, being the parasite prevalence 73.95% for Plasmodium vivax, 17.6% for Plasmodium falciparum, 0.0095% for Plasmodium malariae and 8.42% mixed infections (P. vivax + P. falciparum). During the period 1999-2002 the number of cases in Venezuela ranged between 21,685 and 29,337, being the Sucre State with highest levels of malaria prevalence, with Plasmodium vivax as the unique specie in this region. In 2002 the Municipality of Cajigal had the highest Annual Parasite Incidence (API) of country, being 260 cases per 1000 inhabitants. In view of the difficulty in controlling malaria in this area, the prevalence of asymptomatic carriers was investigated as one of the epidemiological factors contributing to the persistence of malaria transmission. One hundred fifty people were included in the study, with no history of recent malaria infection, or any symptom and also, not having used antimalarial drugs during the 30 days prior to study entry. To do this, a malaria Rapid Diagnostic Test (mRDTs) was used for the determination of antigenemic (OptiMAL®) and PCR (polymerase chain reaction) in conjunction with the reference "Gold Standard", the conventional thick and thin blood smears (TTBS). It was found a prevalence of infection of 1.33% by mRDTs and TTBS and 8% by PCR which allowed the detection of 10 asymptomatic cases in addition, with a sensitivity and specificity of 100% and 93.4% respectively. The presence of asymptomatic carriers in this area reveals the difficulties that face the Malaria Control Program in the eventual elimination of this specific malaria foci. It is necessary reinforces the maintenance of the epidemiological surveillance using more sensitive diagnostic techniques, as well as to adapt the control measures based on the current findings.

La malaria sigue siendo un problema de salud pública en Venezuela. Para el año 2015 el Ministerio del Poder Popular para la Salud reportó 136.402 casos, siendo la fórmula parasitaria 73,95% para Plasmodium vivax, 17,6% para Plasmodium falciparum, 0,0095 para Plasmodium malariae y 8,42% para infecciones mixtas (P. vivax + P. falciparum). Durante el período 1999-2002, el número de casos en Venezuela estuvo entre 21.685 y 29.337, siendo el Estado Sucre el que mostró los niveles más altos de prevalencia de malaria, con P. vivax como única especie en la región. En el año 2002 el Municipio Cajigal registró el Índice Parasitario Anual (IPA) más alto del país, siendo 260 casos por 1000 habitantes. En vista de las dificultades para controlar la malaria en esta área, se investigó la prevalencia de portadores asintomáticos como uno de los factores contribuyentes en la persistencia de la transmisión malárica. Ciento cincuenta personas fueron incluidas en el estudio sin historia de infección reciente por malaria o ningún síntoma, así como no haber consumido drogas antimaláricas durante los 30 días anteriores de ingresar al estudio. Para ello, se usó la prueba rápida de diagnóstico para malaria (PRDxm) para la determinación de antígenemia (OptiMAL®) y la técnica de biología molecular basada en la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), conjuntamente con la "prueba oro," como método convencional, la Gota Gruesa y Extendido de Sangre (GGES). Se encontró una prevalencia de infección de 1,33% por GGES y por prueba rápida de diagnóstico OptiMAL® y 8% mediante PCR. La técnica de PCR permitió la detección adicional de 10 casos asintomáticos con una sensibilidad y especificidad del 100% y 93,4% respectivamente. La presencia de portadores asintomáticos en esta área revela las dificultades que enfrenta el Programa de Control de la Malaria en la eliminación eventual de esta parasitosis en este foco. Es necesario reforzar el mantenimiento de la vigilancia epidemiológica usando técnicas de diagnóstico más sensibles, así como adoptar medidas de control basadas en estos hallazgos.

Malaria congénita: A propósito de un caso / Congenital malaria: Case report

La malaria congénita es una patología relativamente rara en el contexto de las patologías neonatales. El presente caso se trata de un recién nacido masculino de 24 días de vida con malaria congénita por Plasmodium vivax y falciparum cuyo diagnóstico se observó a través del estudio de la gota gruesa. El recién nacido es procedente de una zona poco endémica, pero la madre viajó por compromiso laborales en varias ocasiones a una zona endémica en el Estado Bolívar. La madre presentó malaria gestacional a partir del I trimestre de gestación con tratamiento irregular. Las manifestaciones clínicas del recién nacido fueron fiebre de 40°c y el tratamiento antimalárico fue con Artesunate 60 mg con adecuada respuesta clínica, confirmada mediante la negativización de la gota gruesa al finalizar el tratamiento. Es importante considerar el diagnóstico diferencial con el de sepsis neonatal sobre todo en pacientes procedentes de zonas de riesgo y endémicas. La malaria congénita es real y por lo tanto se recomienda que los recién nacidos de madres con malaria deben ser examinados inmediatamente.

Congenital malaria is a relatively rare disease in the context of neonatal pathologies. We present a case of a 24 day old newborn male with congenital malaria by Plasmodium vivax and falciparum whose diagnosis was performed through the study of thick film. The newborn comes from a non- endemic area were as the mother because of worktravelled to an endemic area of our country in Bolivar state. The mother had a maternal history of seasonal malaria during the I trimester of gestation with irregular treatment. The clinical manifestation of the newborn was fever 40 °c and the antimalarial treatment was performed with Artesunate at 60 mg with adequate clinical response, confirmed by the thick film negativization at the end of the treatment. It is important to consider the differential diagnosis with neonatal sepsis especially in patients from endemic areas and risk. Congenital malaria is real and therefore it is recommended that newborns of mothers with malaria should be examined immediately.

Detección de casos submicroscópicos de Plasmodium spp, utilizando técnicas clásicas y moleculares en pacientes gestantes de Córdoba, Colombia / Detection of submicroscopic infection with Plasmodium spp, using classical and molecular techniques in pregnant patients from Córdoba, Colombia

Introducción: la malaria gestacional afecta a las madres y al embrión o feto en desarrollo; requiere diagnóstico rápido y tratamiento oportuno y efectivo para evitar las complicaciones y muertes. Objetivo: comparar las técnicas de gota gruesa, PCR anidada y PCR en tiempo real (qRT-PCR), para diagnosticar infecciones submicroscópicas por Plasmodium falciparum y P. vivax. Metodología: se estudiaron 21 mujeres con manifestaciones clínicas de malaria, incluyendo gestantes y no gestantes, en Puerto Libertador, Córdoba, Colombia; de todas se obtuvieron muestras de sangre periférica y, en las gestantes, de placenta y cordón umbilical. Se extrajo el ADN y se lo amplificó por PCR anidada y cuantitativa (qRT-PCR). Para el análisis estadístico se usaron los programas Graphpad PRISM y EPIDAT. Resultados: las tres técnicas diagnosticaron satisfactoriamente la presencia de P. falciparum y P. vivax en sangre periférica, cordón y placenta. Las pruebas moleculares presentaron sensibilidad y especificidad del 100%; dos casos de infección por P. falciparum no identificados por gota gruesa (submicroscópicos) se diagnosticaron con las dos técnicas de PCR. Conclusión: la qRT-PCR es ventajosa en comparación con la PCR anidada porque su estandarización es más corta, requiere menos infraestructura y permite cuantificar el ADN.

Introduction: Gestational malaria affects both the mother and the development of her embryo or fetus. Rapid diagnosis and timely and effective treatment are required to prevent complications and deaths. Objective: To compare thick blood smear with nested PCR and real-time PCR (qRT-PCR) for the diagnosis of submicroscopic infections with Plasmodium falciparum and P. vivax. Methodology: 21 women with clinical manifestations of malaria, including both pregnant and non-pregnant, were studied in Puerto Libertador, Córdoba, Colombia. Peripheral blood specimens were obtained from all of them; umbilical cord and placenta blood specimens were taken in the pregnant ones. DNA was extracted and amplified for nested PCR or qRT-PCR. Statistical analysis was done using Graphpad PRISM and EPIDAT softwares. Results: The three techniques were satisfactory for the detection of Plasmodium falciparum and P. vivax in peripheral blood and in the umbilical cord and placenta specimens. Molecular tests were 100% sensitive and specific. Two submicroscopic cases of P. falciparum infection were detected with the two PCR techniques. Conclusion: qRT-PCR is advantageous over nested PCR because its standardization is shorter, it requires lesser infrastructure and it allows the quantification of DNA.

Síndrome de dificultad respiratoria aguda del adulto por Plasmodium vivax / Adult acute respiratory distress syndrome by Plasmodium vivax

El síndrome de dificultad respiratoria aguda del adulto en pacientes con malaria está asociado a infección por Plasmodium falciparum, ocasionalmente manifestado en pacientes infectados por Plasmodium vivax, por lo que han sido pocos los casos reportados en la literatura (1). Reportamos el caso de un paciente de 43 años quien estuvo en área endémica y desarrolló síndrome de dificultad respiratoria aguda del adulto (SDRA) por Plasmodium vivax. El diagnóstico fue realizado por métodos microscópicos. Concluimos que el SDRA asociado a Plasmodium vivax puededesarrollarse antes de iniciar terapia antimalárica, condición con una alta morbimortalidad. (Acta Med Colomb 2014; 39: 211-215).

The adult acute respiratory distress syndrome in patients with malaria is associated with Plasmodium falciparum infection, and only occasionally manifested in patients infected with Plasmodium vivax, so few cases have been reported in the literature. 1 The case of a 43 year old patient who was in an endemic area and developed acute adult respiratory distress syndrome (ARDS) by Plasmodium vivax is reported. The diagnosis was made by microscopic methods. It was concluded that ARDS associated with Plasmodium vivax can develop before starting antimalarial therapy, a condition with high morbidity and mortality. (Acta Med Colomb 2014; 39: 211-215).

Mutaciones puntuales en el gen de la dihidropteroato sintetasa de Plasmodium falciparum en Bolívar, Colombia / Point mutations in the dihydropteroate synthetase gene of Plasmodium falciparum in Bolivar, Colombia

Introducción: la resistencia antimalárica dificulta el control del paludismo en Colombia. La vigilancia molecular de mutaciones puntuales en blancos terapéuticos es fundamental en el estudio de la resistencia a los antimaláricos. Objetivo: identificar mutaciones puntuales en el gen de la dihidropteroato sintetasa de Plasmodium falciparum (pfdhps), asociadas con resistencia in vitro a sulfadoxina. Métodos: la fuente de ADN de Plasmodium falciparum consistió en láminas de gota gruesa de 55 individuos con infección malárica, reportados en el departamento de Bolívar, Colombia. El ADN se extrajo con solución de Chelex-100 al 5 %. Las mutaciones se identificaron mediante PCR-RFLP (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism) y secuenciación. Resultados: 17 muestras (31 %) amplificaron un fragmento de 438 pb de pfdhps. La PCR-RFLP mostró frecuencia del genotipo mutante G-437 en 65 % de los amplificados, el mixto A/G-437 en 29 % y el silvestre A-437 en 6 %. Los alelos mutantes G-437, F-436 y el alelo silvestre K-540 se identificaron en todas las muestras secuenciadas. Conclusiones: este es el primer reporte de mutaciones puntuales en el gen dhps de Plasmodium falciparum en el departamento de Bolívar, Colombia, lo cual contribuye al conocimiento de la resistencia a los antimaláricos en el Caribe colombiano.

Introduction: antimalarial drug resistance hinders the control of malaria in Colombia. The molecular surveillance of point mutations in therapeutic targets is essential in the study of antimalarial drugs. Objective: to identify point mutations at dihydropteroate synthetase gene of Plasmodium falciparum (pfdhps) associated with sulfadoxine resistance. Methods: source of P. falciparum DNA was blood thick smears of 55 individuals with malaria infection, reported in Bolivar, Colombia. The DNA was extracted with 5 %. Chelex-100 solution. The mutations were identified by PCR-RFLP and sequencing. Results: seventeen samples (31 %) amplified a 438 bp fragment of pfdhps. The PCR-RFLP (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism) showed a frequency of mutant genotype (G-437) in 65 % of amplicons, mixed genotype (A/G-437) in 29 % and wild genotype (A/G-437) in 6 %. The mutant alleles G-437, F-436 and the wild allele K-540 were identified in all sequenced samples. Conclusions: this is the first report of point mutations in the P. falciparum dhps gene in Bolivar, Colombia. This result contributes to the knowledge of antimalarial drug resistance in the Colombian Caribbean region.

Hallazgos hematológicos en sangre periférica para sospecha diagnóstica y seguimiento del paludismo / Hematological findings in peripheral blood for diagnosis and monitoring of malaria

Introducción: El Paludismo o la Malaria es una Histohemoparasitosis, causada por Protozoos del género Plasmodium, usando como vector a los mosquitos del género Anopheles. Es la endemia de origen parasitario más importante del mundo, distribuída por diversos países del mundo, incluyendo Argentina. Las alteraciones clínicas se ven reflejadas en diversos cambios bioquímicos durante el curso de la infección. El método diagnóstico más usado y difundido mundialmente sigue siendo el de la Gota Gruesa. Material y Método: En el presente trabajo se estudiaron 40 muestras de sangre anticoagulada con EDTA-K3 de varones adultos, sin comorbilidades asociadas, de diversas nacionalidades, residentes temporarios en Puerto Príncipe, Haití, con diagnóstico de Paludismo. Se analizaron estadísticamente los recuentos celulares y la concentración de hemoglobina al diagnóstico y antes del alta médica, también, se usó un grupo de controles normales. Resultados: Se observó una significativa disminución de los recuentos tanto leucocitarios como plaquetarios en los pacientes al momento del diagnóstico con respecto a un grupo en iguales condiciones, pero sin la infección (controles normales).Discusión: Dichos valores comienzan a aumentar conforme avanza el tratamiento y la negativización de la gota gruesa, pero, en los hemogramas antes del alta, aún siguen siendo significativamente menores con respecto a los de los controles normales. En un subgrupo con la mayor positividad para la gota gruesa, se observa una media aún menor del recuento plaquetario con respecto a los que presentan menor positividad. Conclusiones: Estos patrones que se han identificado en pacientes con infección por Plasmodium, podrían ser útiles, junto con otros parámetros complementarios, para sospechar el diagnóstico de Paludismo aún antes del examen hemoparasitológico de la gota gruesa.

Introduction: Malaria is an Histohemoparasitosis, caused by protozoa of the Plasmodium genus , using Anopheles mosquitoesas vectors. It's the world's largest endemic parasitosis, distributed on different countries, including Argentina.The clinical changes are reflected in various biochemical changes during the course of infection. The most commonly used diagnostic method and worldwide spreaded is still the thick gout.Methods: In this paper we studied 40 blood samples anticoagulated with EDTA-K3 of male adults, without comorbidities, from different nationalities, temporary residents in Port au Prince, Haiti, with Malaria diagnosis. Statistically analyzed cell counts and hemoglobin concentration at moment of diagnosis and prior to discharge also using a group of normal controls.Results: There was a significant decrease in both leukocyte and platelet counts when diagnosed compared with normal controls.Discussion: These values start to increase as treatment progresses and the thick gout becomes negative, but before discharge, blood counts are still significantly lower compared to normal controls. In a subgroup with higher positivity of the thick gout, we observed even lower platelet counts related to those with less positive test.Conclusions: These patterns identified in patients with Plasmodium infection, may be useful, along with other complementary parameters, to suspect diagnosis of malaria even before thick gout examination.